yy.vip易游-郭智勇胡宇芳卿志和Anal Chem：微型便携式电化学传感器检测赖氨酸乙酰转移酶活性！

　　YYVIP易游·(中国有限公司)官方网站-赖氨酸乙酰转移酶的检测对于诊断和治疗癌症至关重要，这突出了高效检测方法的必要性。

　　宁波大学郭智勇、胡宇芳和长沙理工大学卿志和开发了一种便携式、高精度和灵敏的技术，使用了一种新型的微型电化学传感器，利用快速扫描循环伏安法(FSCV)来测定赖氨酸乙酰转移酶TIP60的活性。这种方法涉及一个直径仅为3毫米的紧凑型电化学电池，可容纳高达50 μL的溶液，并配有导电铟锡氧化物工作电极。该系统在与FSCV兼容的双电极模型上运行，消除了对参比电极的传统要求。该系统通过连续产生与Cu(II)反应的CoA分子来检测TIP60活性，从而显著提高乙酰化分析的准确性。TIP60的检测限明显较低，为3.3 pg/mL(S/N=3)。结果表明，抑制剂孵育和葡萄糖刺激可以有效调节可逆的动态乙酰化反应。相关工作以“Portable Detection of Lysine Acetyltransferase Activity in Lung Cancer Cells Based on a Miniature Electrochemical Sensor”为题发表在国际著名期刊Analytical Chemistry上。

　　要点1.作者使用一种新的FSCV技术开发了一种小型电化学工作系统，用于灵敏检测癌症细胞中赖氨酸乙酰转移酶TIP60的活性。这种流线型方法的特点是紧凑的电化学电池(50 μL)只需要两个电极(工作电极和辅助电极)，而不需要额外的电解质池。

　　要点2.该系统在与FSCV兼容的双电极模型上运行，消除了对参比电极的传统要求。该系统通过连续产生与Cu(II)反应的CoA分子来检测TIP60活性，从而显著提高乙酰化分析的准确性。TIP60的检测限明显较低，为3.3 pg/mL(S/N=3)。结果表明，抑制剂孵育和葡萄糖刺激可以有效调节可逆的动态乙酰化反应。

　　要点3.检测机制包括三个关键创新：（1）CoA，乙酰化的副产物，包括半胱氨酸、泛酸和腺苷，形成链状(-CoA-Cu(II)-)结构，克服了未扩增的酶/蛋白质信号的限制；（2）具有欧姆降补偿的FSCV是一种自行建立的系统，可以在还原态(Cu(0))和氧化态Cu(II)之间快速交替，将Cu保持在纳米结构内并保持信号完整性；通过电流/电压(I/V)转换电路获取特殊的时间-电压曲线 μL样品的小型电化学系统，优化痕量分析的空间；在该系统中，ITO基板兼具电化学电池和电极的双重功能，有利于生物传感器的小型化。

　　这一前沿策略通过修改响应单元来增强对广泛生物标志物的分析，其小型化和便携性显著增强了其在生物医学研究中的适用性，有望成为癌症早期诊断和治疗干预的多功能工具。

　　图5.（A）MG149和（B）NU9056对TIP60和p300的FSCV；（C）MG149在不同浓度下(0、0.1、0.3、1、4、10、20、40、50、80、100、200、500、1000、2000和3000 μM)和（D）NU9056在不同浓度(0.01、0.03、0.1、0.3,1、2、5、10、30、50、100、300、600和1000 μM)的FSCV；TIP60对（E）MG149和（F）NU9056浓度的反应的相对活性(%)的抑制测定。[肽]=20 μM，[Ac-CoA]=100 μM，[Cu(NO 3 ) 2 ]=50 μM，[TIP60]=200 ng/mL。

　　图6.（A）癌症细胞在葡萄糖条件下的真实乙酰化反应图；（B）生物传感器在PB缓冲液、血清和尿液中的FSCV；（C）不同样品的荧光响应：（I）18 U/mL HRP和2 mM Amplex Red条件下(激发：571 nm；发射：585 nm；狭缝宽度：10 nm)，不同H 2 O 2 浓度：1，空白对照；2，0.5 mM H 2 O 2 ；3、2 mM H 2 O 2 ；（II）向9 U/mL GOx中加入不同的葡萄糖浓度以评估H 2 O 2 的产生之后：4、0 mM葡萄糖；5、1 mM葡萄糖；6、10 mM葡萄糖；（III）在不同葡萄糖浓度下培养癌症细胞24小时后：7、0 mM葡萄糖；8、1 mM葡萄糖；和9、10 mM葡萄糖；（D）在葡萄糖(细胞2)培养液中培养的正常细胞(细胞1)和癌症细胞提取物的FSCV；（E）不同数量的细胞2的FSCV；（F）用NU9056或MG149孵育的提取物的FSCV。